ксилен цианол купить

Приведенная таблица дает некоторое представление о соотношении подвижностей при умеренной (~6V/cm) скорости фореза (в скобках - при более быстром разгоне):

К сожалению относительная подвижность линейных и кольцевых молекул зависит от условий фореза: % геля, скорость фореза (в частности, это означает, что нельзя пользоваться линейным маркером для оценки размера кольцевых молекул).

Разделение суперскрученных и кольцевых молекул

Верхний предел сильно зависит от напряженности поля, при которой проводится форез. Чем меньше напряженность поля, тем более длинные молекулы можно эффективно разделить.

Меньший предел определяется (в основном) диффузией полосы в геле. Т.е. в гелях с низкой концентрацией агарозы мелкие фрагменты вполне разделяются, но полосы не четкие.

Размер DNA [kbp]5-601-301-200.8-120.6-100.5-80.5-70.4-60.2-30.1-2

% агарозы0.30.50.60.70.80.91.01.21.52.0

Диапазон нормального разделения линейных dsDNA молекул для гелей с различной концентрацией агарозы:

Разделение линейных молекул

ВНИМАНИЕ! Работать в холодной комнате. Гель очень хрупкий, все манипуляции проводить только вместе с 2% подложкой; не лить буфер на поверхность геля. Низкопроцентные гели особенно чувствительны к перегрузке по количеству DNA на дорожку.

гребенку удалять только под слоем буфера, иначе ячейки слипнутся.

залить 0.3% агарозу (лучше в холодной комнате);

на этой подложке закрепить гребенку так, чтобы между зубцами и подложкой было расстояние 1-2mm;

в плашку для электрофореза залить "подложку" — слой агарозы 1.5-2.0% толщиной ~2-3 mm, дать застыть;

Особенности работы с низкопроцентными (0.3%) гелями.

Агарозный гель-электрофорез

     

g g g g g g g g g g g g g g g g g g

> Агарозный гель-электрофорез

   Агарозный гель-электрофорез | molbiol.ru